Инновационный метод ранней иммунологической диагностики метастазов

Опухоль — это динамичное биологическое образование, в котором постоянно происходит множество процессов, часть клеток опухоли во время ее роста отмирают, часть активно пролиферирует, а часть жизнеспособных клеток как бы слущивается с поверхности опухоли и претерпевает определенные изменения, которые биологи и онкологи называют эпителиально-мезенхимальным переходом. В результате подобных изменений опухолевая клетка способна проникнуть через стенку кровеносного сосуда непосредственно в кровь, и такая клетка носит название — циркулирующая опухолевая клетка (или, сокращенно, ЦОК).

Именно ЦОК рассматривается сейчас как один из параметров жидкостной биопсии, выявление которых в периферической крови онкологического пациента может оказаться важным для дальнейшей тактики лечения.

Не каждая ЦОК способна привести к развитию метастаза, и большинство из них будут инактивированы клетками и биологически активными компонентами крови. И все же часть ЦОК (это, как правило, единичные гиперактивные клетки) по кровеносным и лимфатическим сосудам попадают в мозг, легкие, печень, костную ткань, позвоночник, почки. Попав во внутренние органы и осев там, клетки уже приобретают статус ДОК (диссеминированные опухолевые клетки), где могут сохраняться в дремлющем состоянии продолжительное время. Дремлющее состояние таких клеток биологами характеризуется на основании оценки фазы клеточного цикла клетки (это тот период, когда клетка не делится активно). Однако при определенном стимуле, сигнале эти клетки просыпаются, начинают делиться и формируют уже клинически значимый (видимый для стандартных методов обследования) метастаз.

Считается, что клетки, которые прошли эпителиально-мезенхимальное превращение, обладают рядом особых свойств — и, главное, они могут быть устойчивы (т. е. резистентны) к химиолучевой терапии.

С учетом биологической неоднородности ЦОК (часть из них жизнеспособны, часть нет, часть ЦОК может прейти в ДОК, часть будут удалены из периферической крови, а часть приобретет агрессивные свойства) важна комплексная оценка ЦОК в динамике, то есть во время и после проведенного комплексного лечения. При выявлении ЦОК больной может быть условно отнесен в группу высокого риска метастазирования.

Современные лабораторные методы, и в частности метод, реализуемый в МРНЦ им. А.Ф. Цыба, основанный на иммунологическом выявлении и характеристике ЦОК и ДОК, позволяют определять как количество ЦОК, так и оценивать их качество и жизнеспособность, то есть факторы, связанные с вероятностью формирования отдаленных клинически значимых метастазов болезни.

Циркулирующие опухолевые клетки можно выявить при большинстве эпителиальных опухолей (аденокарцином и плоскоклеточных раков), а также при меланоме. Их наибольшая прогностическая значимость на данное время определена для опухолей молочной железы, рака простаты и колоректальных раков. Пороговыми значениями считаются <5 ЦОК в 7,5 мл крови при раке молочной железы и раке простаты, <3 ЦОК при колоректальном раке. Установлено, что повышение количества ЦОК выше таких значений взаимосвязано с прогнозом течения болезни и укорачивает период жизни без рецидива.

Оценка минимального поражения костного мозга (то есть оценка количества ДОК) важна для пациентов, страдающих меланомой кожи/слизистых или раком молочной железы, поскольку метастатическое поражение костного мозга не редкость для данной патологии, и выявление такого неявного поражения на нераспространенной стадии болезни может оказаться важным для предотвращения массивного распространения опухолевого процесса.

Современные методы лабораторной диагностики позволяют выявлять как единичные опухолевые клетки, так и их комплексы посредством иммунологических методик. При оценке ЦОК пациент сдает кровь из периферической вены в специальную пробирку с консервантом (К3ЭДТА), предотвращающим процессы свертывания крови. Кровь будет специальным образом обработана, выделены живые клетки (лейкоциты), и среди них будут выявляться клетки с особым набором белковых маркеров на поверхности (оценивается комплекс эпителиальных маркеров и из анализа исключаются клетки кроветворной природы, то есть клетки крови). Эти белковые маркеры выявляются при инкубации клеток образца с реагентами, меченными специальными флуоресцентными метками, которые в случае их присутствия будут выявлены на приборе путем лазерной детекции (метод многопараметровой проточной цитометрии).

Для того чтобы выявить эти единичные клетки (а частота их мала и не превышает иногда 1 клетку на 100 000 клеток крови), необходимо исследовать не менее 10 мл периферической крови. Исследование ЦОК является достаточно трудоемким, необходимо проанализировать огромное количество клеток крови, чтобы выявить истинные единичные ЦОК, поэтому выполняется оно не менее 3–4 дней.

Методика оценки количества ДОК аналогична методам выявления ЦОК, однако в случае ДОК анализируется уже не периферическая кровь, а пунктат костного мозга. Клеточность костного мозга, как правило, высока, и для выявления ЦОК  достаточно 0,5 мл жидкого костного мозга, полученного путем аспирационной биопсии. Такую манипуляцию выполняет доктор-гематолог, проведена данная манипуляция может быть амбулаторно, то есть во время поликлинического приема.

В случае анализа ЦОК  соблюдать условие «на голодный желудок» необходимости нет.

С помощью анализа крови и методов жидкостной биопсии возможно:

1. спрогнозировать вероятность развития метастазов — как в ближайшем, так и в отдаленном будущем;
2. мониторировать эффективность комплексного лечения (то есть наиболее полно оценить распространенность заболевания или эффективность проводимого лечения).

Иммунологическое исследование клеток костного мозга (диссеминированные опухолевые клетки), 6-цветная проточная цитометрия;

Иммунологическое исследование опухолевых клеток периферической крови (циркулирующие опухолевые клетки), 6-цветная проточная цитометрия

Исследования на выявление ЦОК и ДОК проводятся на базе Отдела лабораторной медицины МРНЦ имени А.Ф. Цыба.

Исследование по выявлению ЦОК проводится с понедельника по четверг, предварительной записи не нужно.

Исследование ДОК проводится по предварительной записи по телефону: +7 (800) 250-87-00.

Через 4–5 рабочих дней Вы получите ответ!